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兰州兽研所布鲁氏菌感染事件:实验室生物防护安全保障,这几点必不可少!

2019-12-14 10:12:06

12月6日,中国农业科学院兰州兽医研究所发布通报称,11月28-29日,该所口蹄疫防控技术团队先后报告有4名学生布鲁氏菌病血清学阳性。在后续检测中发现65人呈现血清学阳性。

截至12月7日12时,兰州兽医研究所317名师生进行布鲁氏菌检测,其中已有96人呈血清学阳性,尚无明显症状,被诊断为隐性感染。

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北京地坛医院退休主任医师蔡晧东从事传染病研究四十年,他推测,实验室师生集体感染,一定违反了操作规范!

蔡晧东说,涉及的操作规范包括:实验室硬件设施是否具备(譬如涉及布鲁氏菌疾病的试验,需在P3级安全防护标准下进行)、人为操作是否规范、是否存在突发意外感染(譬如含有布鲁氏菌的容器打破形成气溶胶吸入感染)等。

首都医科大学附属北京佑安医院感染中心教授吴昊也推测实验室防护可能存在漏洞
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这样一家具有行业优势的科研机构爆发安全事件,体现出了实验室安全管理的任重道远。而要避免类似事件发生,不仅仅是要注重人为操作行为的规范,对于实验室硬件设施如生物安全柜、洁净工作台等基础防护措施的定期检测、维护也同样必不可少!

生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

生物安全柜使用到一定年限后容易造成以下风险:

(1)高效过滤器上聚集大量的细菌、灰尘、各种危险因子
(2)堵塞过滤器的正常送风,影响安全柜的气幕,间接影响设备使用者的安全
(3)垂直下降气流经过过滤器,容易有污染的细菌掉落在实验台面上,直接影响实验的结果,导致误诊而危害到病人的生命
(4)若有危害气溶胶泄露,设备使用者暴露在有危害气溶胶的环境中将非常危险,直接影响生命安全

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生物安全柜直接保护受污染风险最高的操作者,是生物安全的第一道也是最关健的一道防线。生物安全柜的使用监测、定期检测以及高效过滤器的定期更换,是确保设备处于安全状态的必要措施,也是实验室生物安全防护的基本要求。


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生物安全柜检测
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生物安全柜在安装时以及以后每隔一定时间,要由有资质的专业人员按照规定对每一台生物安全柜的整体运行性能进行生物和物理认证,以检查其是否符合国家及国际的性能标准。

安全柜防护效果的物理学评估应该包括:

①. 安全柜的整体、HEPA过滤器的泄漏
②. 空气向下流动的速率、进口空气的速率
③. 负压/换气次数
④. 气流的稳定性(烟雾特征)
⑤. 以及警报和自控(互锁)系统
⑥. 漏电
⑦. 照度
⑧. 紫外线强度
⑨. 噪声
⑩. 震动性的测试

生物学评估包括:

①. 对个体保护效果
②. 对环境保护效果
③. 样品保护试验
④. 交叉污染试验

生物安全柜检测现行的主要标准依据有:
(1)欧盟EN 12469:2000《Biotechnology-Peformance Criteria for Microbiological Safety Cabinets》 
(2)美国NSF/ANSI 49—2002《Class II (Laminar Flow)  Biosafety Cabinetry》
(3)JG 170-2005中华人民共和国建筑工业行业标准《生物安全柜》
(4)YY 0569-2005中华人民共和国医药行业标准《生物安全柜》


根据WS 233-2002《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》 的相关规定:有下列情况之一时,必须对Ⅱ级生物安全柜进行现场检测 :
(1)实验室施工时,Ⅱ级生物安全柜搬放到指定位置后。
(2) Ⅱ级生物安全柜被移动位置后。
(3) 对Ⅱ级生物安全柜进行检修后。
(4) Ⅱ级生物安全柜更换高效过滤器后。
(5) Ⅱ级生物安全柜一年一度的常规现场检测


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更换高效过滤器
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以上可以看出,一年一度的常规生物安全柜检测是必不可少的,但除此之外,生物安全柜还有一个部位往往会被使用者忽略——高效过滤器。

许多人或许认为生物安全柜使用保养做好,正常检测就可以一直使用,但他们往往忽视了最重要核心部件的安全。高效过滤器是生物安全柜中的关键组成,主要起到过滤细菌和灰尘颗粒的作用,以净化吹入安全柜工作区和排放出的气体。

高效过滤器有其使用寿命,随着使用期的延长,尘埃及细菌积聚于过滤器会导致高效过滤器压力损失的增大安全柜里所使用的过滤器一定要有足够的过滤效率,否则就起不到防护生物危害的作用。

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Q:

如何判断高效过滤器需要更换?

A:

1--设备在运行过程中,若设备发出声光报警且是因下降气流或流入气流流速低造成的,说明过滤器堵塞已经严重,系统无法调整达到规定的风速值,此时建议咨询售后工程师进行检测或者更换高效过滤器。

2--若机器预警提示过滤器有问题,则通常需要先请专业人员检测问题,可能需要更换过滤器,但不是必须更换,还要考虑使用环境的洁净程度,使用习惯等.推荐采用1方法判断是否需要更换过滤器。


生物安全柜高效过滤器的更换同样也需要专业的人员进行操作,并不是简单的换装,其步骤如下:

(1) 甲醛熏蒸消毒
(2) 碳酸氢氨中和
(3) 更换上下过滤器
(4) 安全检测

其所有步骤都需要专业人员穿着个人防护装备(PPE),包括手套、工作服进行操作并在更换完成之后进行生物安全柜高效过滤器完整性检测,确保换装安全。


高效过滤器完整性检测


1、运行安全柜的风机和灯,去掉过滤器的散流装置和保护盖。安放气溶胶发生器,将气溶胶导入安全柜,产生均匀分布的高效过滤器上游气流。


2、打开气溶胶光度计,进行调整;对含有气溶胶的高效过滤器上游气流进行测试


3、光度计探头在过滤器下游距过滤器表面以规定的扫描速率移动,使探头扫测过滤器的整个下游一侧和每个组合过滤片的边缘,扫测路线应略微重叠。


兰州兽研所事件给全体科学工作者敲响了警钟,实验室生物安全防护要从源头抓起,做到防患于未然,要定期进行生物安全防护设备的检测和维护。

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